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液相色谱仪使用中的常见问题

在实验室使用液相色谱仪器操作当中,经常会出现一些故障,这些故障都是由于哪些原因引起的?我们一起梳理一下出现故障的原因在哪,再进行逐一排查。
  1、压力过高或过低
  可能是是管路被堵塞,需要清除和清洗。压力降低的原因则可能是管路有泄漏。检查堵塞或泄漏时应逐段进行。在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此带来一些特殊问题,必须充分重视。
  2、梯度洗脱的流动相选择不当
  要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。
  3、空白梯度洗脱
  梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需完全脱气,以防止混合时产生气泡。
  4、溶剂混合所带来的粘度变化
  混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲C和水粘度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲C或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过泵或色谱柱能承受的压力。
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